第五十四期 Toyopearl HW系列分子筛填料在天然产物纯化中的应用

2015年02月11日来源:管理员
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TOYOPEARL HW 和 TSKgel PW 型尺寸排阻树脂是所有东曹公司离子交换、疏水作用和亲合层析填料产品的基质。在初步聚合反应产生特定的填料粒径和孔径后,通过化学修饰改变树脂表面特征以获得特定的产品。TOYOPEARL HW产品属于羟基化的聚甲基丙烯酸类树脂。通过化学手段,获得不同粒径(30μm或以上)和孔径大小的TOYOPEARL HW型尺寸排阻填料。它们与TSKgel PW填料相比,交联度更低。低交联使得在生产以TOYOPEARL HW为基质的离子交换和疏水填料时,能够提供更多的配体固定化反应或修饰位点。因此,与相应的TSKgel PW 基质相比,修饰后的TOYOPEARL HW 树脂填料具有更高的动态吸附载量。HW 和 PW 树脂填料由于具有同样的基质骨架,相同类型官能团的填料对于蛋白质或杂质的保留具有相似的选择性。 TOYOPEARL HW 树脂填料,可以在高线性流速下使用,且能承受高达3bar的工作压力。

Toyopearl

分子量排阻范围

Sephadex

右旋糖酐

蛋白

HW-40

100-7000

100-10000

LH-20,G-25

HW-50

500-20000

500-80000

G-75,G-100,G-150

HW-55

1000-200000

1000-700000

G-100,G-200

HW-65

10000-1000000

50000-1000000

6B,4B

HW-75

100000-10000000

500000-50000000

4B,2B

填料粒径   S级:20-40μm

           F级:30-50μm

           C级:50-100μm

           EC级:100-300μm(只针对HW-40提供EC级粒径的填料)

与糖相比,由于蛋白结构紧凑,因此同类分子筛填料对糖和蛋白的排阻界限有所差别。Toyopearl填料的骨架为含羟基的亲水性聚甲基丙烯酸树脂,由于不含糖基,与多糖类填料相比,不会和糖类样品发生非特异性相互作用。

使用HW填料对各种糖类进行分析的应用汇总表

 

化合物

Toyopearl填料

备注

酸性环糊精/Acidic cyclodextrin

SP-650C,HW-40F

*

酸性寡糖/Acidic oligosaccharide

DEAE-650M

1-100 mM KCl梯度

抗肝炎多糖/Anti-hepatitis   polysaccharide

DEAE-650C

*

支链低聚果糖/Branched   fructooligosaccharide

HW-40S

*

致癌物抑制剂/Carcinogen promoting   inhibitor

HW-65F

*

性腺A/Gonaderan A

DEAE-650

*

紫草多糖/Lithosperman A

DEAE-650

*

麦芽戊糖苷/Maltopentoside

HW-40S

流动相:水

多糖/Polysaccharide

HW-65F

0.1    M NaCl

淀粉/Starch

HW-75F


TX-1多糖/TX-1   polysaccharide

HW-65F

*

 

低分子生物活性物质的分离


化合物

Toyopearl填料

备注

Acakyphidins

HW-40


花青素/Anthocyanin

HW-40F


蒽醌/Anthraquinone

DEAE-650C

*

Black vinegor

HW-50F

流动相:水

儿茶酚/Catechin

HW-40


栗瘿鞣质/Chestanin

HW-40F

流动相:50%的甲醇

地高辛/Digoxin

HW-40F

流动相:50%的甲醇

Epigarocatechin

HW-40


黄烷/Flavan

HW-40C


类黄酮配糖类/Flavonoid glycoside

HW-40


没食子酰熊果酚苷/Galloylarbutin

HW-40F


异黄酮/Isoflavonoid

HW-40

流动相:甲醇/水=70/30

哇巴因/Ouabain

HW-40F

流动相:50%的甲醇

植物生长激素/Plant growth hormone

HW-40


多酚/Polyphenol

HW-40C,   HW-40EC


花色素低聚物/Proanthocyndin oligomer

HW-40F

*

原花青素/Procyanidine

HW-40S,HW-40F


丹宁酸/Tannin

HW-40


茶黄素/Theaflavin

HW-40

*

 

结论:

 

Toyopearl HW-40 系列填料具有很多的优势:

 

1. 优异的刚性强度和化学稳定性

   * 可以放大至更大的制备规模和获得更高的流速(适用于超过200L的层析制备柱)

   * 适用于强碱溶液

2. 4种不同的粒径可供选择

   * S级(30μm)、F级(45μm)、C级(100μm)和EC级(200μm)

   * 高分辨率、高流速。

3. 适用于水和各种有机溶剂

   * 甲醇、乙腈、丙酮、四氢呋喃等等

   * 根据样品的溶解性来选择合适的有机溶剂(流动相)

 

Toyopearl 填料使用上的注意点:

 

1.     装填前的匀浆准备

Toyopearl系列产品出货时保存在20%的乙醇中(乙醇/水=20/80)。需要注意的是,如果需要在氯仿、四氢呋喃、乙酸乙酯等非极性溶剂中使用时,需要进行逐步置换,而不能进行互不相溶的溶液间的直接替换。

2     填料的装填

Toyopearl填料的刚性强度好,相比琼脂糖、葡聚糖基质的软胶来讲,更适宜在高流速下进行装填以便获得更高柱效、更高分辨率的层析柱。



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