一、前言
目前,人们对以免疫球蛋白(IgG)为主的抗体药物的需求日益高涨。在抗体药物的研发以及制备工艺建设中,由于IgG表达需进行筛选,所以必须快速及准确地定量细胞培养液中的IgG。而且,即使在工业制备过程中,IgG的定量也是重要的质量控制项目之一。为此,日本东曹公司特推出以多孔亲水性聚合物为基质,表面键合有重组Protein A官能团的TSKgel Protein A-5PW亲和色谱柱,用于IgG的快速、高分离度分析。
二、特点
1、填料粒径20μm,机械强度高,可用于IgG的快速分析;
2、柱身为PEEK材质,大大减少非特异性吸附;
3、对IgG有很高的动态吸附载量,定量范围宽;(IgG浓度:0.1~10g/L)
4、标准流速2.0ml/min条件下2min内可完成分析,也能够在高流速4.0ml/min下进行分析;
5、色谱柱耐用性好,使用寿命长;(取CHO细胞培养液上清液连续进样2000次以上色谱柱性能不变)
6、与TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F亲和层析介质具有相同的官能团,所以也有着相同的分离选择性,同样耐碱,有利于生产放大。
三、目标分析对象
■ IgG
■ Fc融合蛋白
四、用途
■ 对CHO细胞培养上清液中的IgG定量
■ 培养条件的摸索
■ 生产工艺的管理
五、产品一览表
名称 | TSKgel Protein A-5PW |
货号 | 023483 |
基质 | 多孔的亲水性聚合物 |
粒径 | 20μm |
孔径 | 1000? |
官能团 | 重组Protein A Hexamer of C domain |
色谱柱尺寸 | 4.6×35mm |
色谱柱材质 | PEEK |
六、应用实例
1. 多克隆IgG的分离
2. IgG的校准曲线
3. 流速对分离效果的影响
4. 连续进样测试中的色谱图以及进样测试前后的IgG校正曲线
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