第134期 工艺开发及填料筛选的神器—Tosoh SkillPak 1ml&5ml预装柱
SkillPak 1 mL 和5 mL 层析柱主要用于快速实现纯化方法的开发及优化、填料的筛选以及样品的浓缩。两种不同尺寸层析柱都预装填了各类TOYOPEARL、TSKgel 以及Ca++Pure-HA填料，能够对生物大分子，如单克隆抗体、蛋白质和寡核苷酸等进行出色的纯化评价、评估。
SkillPak 1 mL 和5 mL 预装柱为从平台工艺开发到中试规模纯化而设计。这类预装层析柱一经收到即可立即投入使用，由于具有优异的刚性强度和理想的压力/流速特性，尤其适合下游纯化工艺。
以下表1 和表2 列出了SkillPak 1 mL 和5 mL 层析柱的规格及使用方法。SkillPak 层析柱性能卓越、稳定可靠，可与常用的低压或中压液相色谱/层析系统配合使用。该类层析柱不仅可以重复再生使用，还充分考虑了每种填料不同的装填压缩比。因此，能够精确展示各种尺寸层析柱的代表性状态。
表1. SkillPak 1 mL 层析柱的规格参数
层析柱尺寸 | 7 mm I.D. × 2.5 cm 柱床高度 |
填料柱床体积 | 1ml |
最大流速 | 4 mL/min (600 cm/hr) |
最大操作压力 | 0.3 MPa |
连接 | 标准接头（10-32 用于1/16 英寸毛细管） |
出货溶液 | TOYOPEARL 和TSKgel 为20%乙醇（TSKgel SP-5PW（20）和SuperQ-5PW（20）为0.5 mol/L 柠檬酸钠+20%乙醇）；Ca++Pure-HA 为20 mmol/L 磷酸盐+20%乙醇 |
表2. SkillPak 5 mL 层析柱的规格参数
层析柱尺寸 | 8 mm I.D. × 10 cm 柱床高度 |
填料柱床体积 | 5 mL |
标准流速 | 1.3 mL/min (150 cm/hr) |
最大流速 | TOYOPEARL M 和C 级填料为5 mL/min（600 cm/hr）；对于TOYOPEARL S 级、TSKgel、Ca++Pure-HA 和TOYOPEARL F 级填料，包括TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F、TOYOPEARL AF-rProtein L-650F 为2.5 mL/min（300 cm/hr） |
最大操作压力 | TOYOPEARL 填料为0.3 MPa；TSKgel 和Ca++ Pure-HA 填料≤0.4 MPa |
连接 | 标准接头（10-32 用于1/16 英寸毛细管) |
出货溶液 | TOYOPEARL 和TSKgel 为20%乙醇； Ca++Pure-HA 为20 mmol/L 磷酸盐+20%乙醇 |
不对称因子（As） | TOYOPEARL 和TSKgel 为0.8-1.4；Ca++Pure- HA 为0.8-2.6 |
应用
mAb 纯化工艺开发：使用SkillPak 5 mL 层析柱捕获完整抗体
将340 mL 杂交瘤细胞培养上清液（滴度：0.03 g/L）进样至预装TOYOPEARL AF-rProtein A HC 650F 填料的SkillPak 5 mL 层析柱中。
条件：
层析柱：SkillPak 5 mL TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F
平衡溶液：0.1 mol/L Na2HPO4/NaH2PO4，0.15 mol/L NaCl，pH 7.3
进样后第1 次淋洗：平衡溶液（5 CV）
进样后第2 次淋洗：0.1 mol/L 醋酸盐（NaOH），pH 5.0（5 CV）
洗脱溶液：0.1 mol/L 醋酸盐（NaOH），pH 3.5（5 CV）
层析柱再生：0.1 mol/L 乙酸，pH 2.9（3 CV）
层析柱清洗：0.2 mol/L NaOH（3 CV），保持15 分钟
流速（进样）：150 cm/hr（1.25 mL/min），相当于4 分钟柱留时间
流速（淋洗/洗脱）：240 cm/hr （2.0 mL/min）（AKTA avant 25）
温度：环境温度（室温）
样品：340 mL 杂交瘤细胞培养上清液（经缓冲溶液配制）
在pH 5.0 下经短暂淋洗后，可在pH 3.5 下洗脱开始时获得一尖锐有效的洗脱峰（图2）。收集洗脱组分峰（4.8 mL），计算得mAb 的总回收量为9.8 mg。
图1. 使用SkillPak 5 mL TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F 层析柱捕获完整mAb
订购信息：SkillPak 1 mL 层析柱
货号 | 描述 |
亲和模式 | |
45200 | SkillPak TOYOPEARL AF-rProtein L-650F 1 mL 层析柱 |
45221 | SkillPak TOYOPEARL AF-rProtein L-650F 1 mL 层析柱（数量5) |
45201 | SkillPak TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F 1 mL 层析柱 |
45222 | SkillPak TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F 1 mL 层析柱（数量5) |
45202 | SkillPak TOYOPEARL AF-Chelate-650M 1 mL 层析柱 |
离子交换模式 | |
45203 | SkillPak TOYOPEARL GigaCap Q-650M 1 mL 层析柱（数量5) |
45204 | SkillPak TOYOPEARL GigaCap S-650S 1 mL 层析柱（数量5) |
45205 | SkillPak TOYOPEARL Sulfate-650F 1 mL 层析柱（数量5) |
45206 | SkillPak TOYOPEARL SuperQ-650S 1 mL 层析柱（数量5) |
45207 | SkillPak TSKgel SP-5PW (20) 1 mL 层析柱（数量5) |
45208 | SkillPak TSKgel SuperQ-5PW (20) 1 mL 层析柱（数量5) |
45209 | SkillPak TOYOPEARL NH2-750F 1 mL 层析柱（数量5) |
45210 | SkillPak TOYOPEARL GigaCap DEAE-650M 1 mL 层析柱（数量5) |
45211 | SkillPak TOYOPEARL GigaCap CM-650M 1 mL 层析柱（数量5) |
45212 | SkillPak TOYOPEARL QAE-550C 1 mL 层析柱（数量5) |
45213 | SkillPak TOYOPEARL SP-550C 1 mL 层析柱（数量5) |
疏水模式 | |
45214 | SkillPak TOYOPEARL Butyl-600M 1 mL 层析柱（数量5) |
45215 | SkillPak TOYOPEARL Butyl-650M 1 mL 层析柱（数量5) |
45216 | SkillPak TOYOPEARL Phenyl-600M 1 mL 层析柱（数量5) |
45217 | SkillPak TOYOPEARL Phenyl-650M 1 mL 层析柱（数量5) |
45218 | SkillPak TOYOPEARL PPG-600M 1 mL 层析柱（数量5) |
45219 | SkillPak TOYOPEARL Hexyl-650C 1 mL 层析柱（数量5) |
45220 | SkillPak TOYOPEARL Ether-650M 1 mL 层析柱（数量5) |
混合模式 | |
45224 | SkillPak TOYOPEARL MX-Trp-650M 1 mL 层析柱（数量5) |
分子筛模式 | |
45223 | SkillPak TOYOPEARL HW-40F 1 mL 层析柱（数量5) |
羟基磷灰石 | |
45225 | SkillPak Ca++Pure-HA 1 mL 层析柱 |
层析柱套装 | |
45226 | SkillPak 阴离子交换 1 mL 层析柱套装，1 mL×2 ea （TOYOPEARL GigaCap Q-650M、GigaCap DEAE-650M、NH2-750F） |
45227 | SkillPak 阳离子交换 1 mL 层析柱套装，1 mL×2 ea （TOYOPEARL GigaCap S-650S、GigaCap CM-650M、Sulfate-650F） |
45228 | SkillPak 抗体纯化平台用 1 mL 层析柱套装，1 mL×1 ea （TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F、AF-rProtein L-650F、NH2-750F、Sulfate-650F、GigaCapQ-650M、GigaCapS-650S） |
45229 | SkillPak mAb 纯化平台用 1 mL 层析柱套装，1 mL×2 ea （TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F、Sulfate-650F、NH2-750F） |
45230 | SkillPak 耐盐型填料 1 mL 层析柱套装，1 mL×3 ea （TOYOPEARL Sulfate-650F、NH2-750F） |
45231 | SkillPak 混合模式 1 mL 层析柱套装，1 mL×3 ea （Ca++Pure-HA、TOYOPEARL MX-Trp-650M） |
45232 | SkillPak 同类一流 1 mL 层析柱套装，1 mL×1 ea （Ca++Pure-HA、TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F、AF-rProtein L-650F、NH2-750F、Sulfate-650F） |
45233 | SkillPak 疏水模式 1 mL 层析柱套装，1 mL×1 ea （TOYOPEARL Butyl-650M、Phenyl-650M、PPG-600M、Hexyl-650C、Ether-650M） |
45234 | SkillPak 疏水模式 1 mL 层析柱套装，1 mL×1 ea （TOYOPEARL Butyl-600M、Phenyl-600M、PPG-600M、Hexyl-650C、Ether-650M） |
45235 | SkillPak 疏水模式 1 mL 层析柱套装，1 mL×2 ea （TOYOPEARL Butyl-650M、Phenyl-650M、PPG-600M） |
45236 | SkillPak 疏水模式 1 mL 层析柱套装，1 mL×2 ea （TOYOPEARL Butyl-600M、Phenyl-600M、PPG-600M） |
45237 | SkillPak 疏水模式 1 mL 层析柱套装，1 mL×2 ea （TOYOPEARL Phenyl-650M、PPG-600M、Hexyl-650C） |
45238 | SkillPak 疏水模式 1 mL 层析柱套装，1 mL×2 ea （TOYOPEARL Phenyl-600M、PPG-600M、Hexyl-650C） |
订购信息：SkillPak 5 mL 层析柱
货号 | 描述 |
亲和模式 | |
45257 | SkillPak TOYOPEARL AF-rProtein L-650F 5 mL 层析柱 |
45258 | SkillPak TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F 5 mL 层析柱 |
45259 | SkillPak TOYOPEARL AF-Chelate-650M 5 mL 层析柱 |
离子交换模式 | |
45239 | SkillPak TOYOPEARL GigaCap Q-650M 5 mL 层析柱 |
45240 | SkillPak TOYOPEARL GigaCap S-650S 5 mL 层析柱 |
45241 | SkillPak TOYOPEARL Sulfate-650F 5 mL 层析柱 |
45242 | SkillPak TOYOPEARL SuperQ-650S 5 mL 层析柱 |
45243 | SkillPak TSKgel SP-5PW (20) 5 mL 层析柱 |
45244 | SkillPak TSKgel SuperQ-5PW (20) 5 mL 层析柱 |
45245 | SkillPak TOYOPEARL NH2-750F 5 mL 层析柱 |
45246 | SkillPak TOYOPEARL GigaCap DEAE-650M 5 mL 层析柱 |
45247 | SkillPak TOYOPEARL GigaCap CM-650M 5 mL 层析柱 |
45248 | SkillPak TOYOPEARL QAE-550C 5 mL 层析柱 |
45249 | SkillPak TOYOPEARL SP-550C 5 mL 层析柱 |
疏水模式 | |
45250 | SkillPak TOYOPEARL Butyl-600M 5 mL 层析柱 |
45251 | SkillPak TOYOPEARL Butyl-650M 5 mL 层析柱 |
45252 | SkillPak TOYOPEARL Phenyl-600M 5 mL 层析柱 |
45253 | SkillPak TOYOPEARL Phenyl-650M 5 mL 层析柱 |
45254 | SkillPak TOYOPEARL PPG-600M 5 mL 层析柱 |
45255 | SkillPak TOYOPEARL Hexyl-650C 5 mL 层析柱 |
45256 | SkillPak TOYOPEARL Ether-650M 5 mL 层析柱 |
混合模式 | |
45261 | SkillPak TOYOPEARL MX-Trp-650M 5 mL 层析柱 |
分子筛模式 | |
45260 | SkillPak TOYOPEARL HW-40F 5 mL 层析柱 |
羟基磷灰石 | |
45262 | SkillPak Ca++Pure-HA 5 mL 层析柱 |
层析柱套装 | |
45263 | SkillPak mAb 纯化平台用 5 mL 层析柱套装，5 mL×1 ea （TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F、Sulfate-650F、NH2-750F） |
45264 | SkillPak 耐盐型填料 5 mL 层析柱套装，5 mL×1 ea （TOYOPEARL Sulfate-650F、NH2-750F） |
45265 | SkillPak 混合模式 5 mL 层析柱套装，5 mL×1 ea （Ca++Pure-HA、TOYOPEARL MX-Trp-650M） |
45266 | SkillPak 同类一流 5 mL 层析柱套装，5 mL×1 ea （Ca++Pure-HA、TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F、AF-rProtein L-650F、NH2-750F、Sulfate-650F） |
