抗体纯化用亲和层析填料
抗体是一种结构复杂的糖蛋白。即使是天然抗体,其结构也是各不相同。抗体类药物在其生产工艺(培养、分离纯化)或贮存过程中容易导致产品的不均一性,所以在药物研发以及纯化、生产过程中,对抗体药物的定量和定性的分析时非常重要的。
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        Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质,能特异性地与人和哺乳动物抗体(主要是IgG)的Fc区结合。因而,将Protein A 与层析介质以一定的方式结合,可制备用于抗体纯化的亲和填料。
       
早期的Protein A柱结合的都是天然Protein A。天然Protein A5IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成,分子量约42KDa,结构如下图所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强,可以吸附大量的lgG。但同时,天然Protein A的其他非结合域会和非目标蛋白结合,这样被洗脱下来的蛋白质纯度不够,会影响到后续的试验。


产品特点
 

产品

目标配体

粒径(μm

每毫升结合量

应用

pH稳定性

工作(清洗)

最高流速

cm/h

rProtein A

Sepharose FF

6mg重组Protein A

60-165

50mg人类IgG

30mg小鼠IgG

是实验室和工业规模从细胞培养纯化和回收抗体的理想选择

3-102-11

300

nProtein A

Sepharose 4FF

6mg Protein A

45-165

35 mg人类IgG

抗体纯化,无任何动物衍生组分

3-92-10

300

rmpProtein A

Sepharose 4FF

6mg重组Protein A

60-165

35 mg人类IgG

低脱落、一步高纯度纯化单抗和多抗

3-102-11

300

Protein A

Sepharose CL-4B

2-3 mg Protein A

45-165

16-25mg人类IgG

2mg小鼠IgG

纯化体液或细胞培养液中的免疫球蛋白

3-92-10

150

Protein G

Sepharose 4FF

2 mg

蛋白G

45-165

24mg人类IgG

23mgIgG

17mg天竺鼠IgG19mg山羊IgG

7mg大鼠IgG10mg小鼠IgG

3-92-9

400

GammaBind G

Sepharose

-

45-165

17mgIgG

结合来自人、小鼠、大鼠的所有IgG亚基,结合来自豚鼠、山羊、牛、绵羊和马的所有IgG

3-92-9

130

-

GammaBind Plus

Sepharose

-

45-165

20mgIgG

增加大鼠和小鼠单抗的载量(还有人、牛、绵羊、马、兔和山羊)

3-92-9

130

-

KappaSelect

11 mg Fab/ml

75

-

主要特异性吸附抗体的Fab,或纯化Fab融合蛋白

3-10

600

IgSelect

S.Cerevisiae产生的重组的14kD蛋白

75

17mg/min

(在2.4min保留时间内)

特异纯化人类IgG,能结合人类IgG的所有亚型,包括IgG3

2-11(长期)

1-13(短期)

600

Capto L

10mg/ml

85

25mg人类 Fab

纯化广泛的抗体片段,例如Fabs,单链可变区片段(scFv)和区域抗体(Dabs),包括kappa的轻链

2-10

500cm/20cm柱床


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